第211章 询问病人家属情况(2/2)
“张姐,帮我开一下3号生物安全柜,我要处理脑脊液样本。”
花瑶对一位正在调试仪器的资深技术员说道。
“瑶瑶来了啊,又接疑难杂症了?”
张姐笑着打趣,一边熟练地帮她打开设备,
“小心点操作。”
“嗯,急诊科刚收的,情况不太好。”
花瑶点点头,戴上无菌手套和护目镜,小心翼翼地将样本放入安全柜。
她首先进行了革兰氏染色和普通细菌培养的涂片,这是快速排查细菌感染的第一步。
接下来,是关键的特殊病原体检测。
她准备使用实时荧光定量PCR的方法,
针对几种常见的山区蜱媒传染病病原体,
如无形体、巴贝西虫,以及一些嗜神经病毒进行筛查。
当她按照标准流程设置反应体系时,却遇到了麻烦。
“奇怪,这个引物的溶解曲线怎么这么奇怪?”
花瑶盯着PCR仪连接的电脑屏幕,眉头紧锁。
曲线不仅峰值不尖锐,还有明显的杂峰,
这意味着要么是引物设计有问题,
要么是样本中存在某种抑制物,或者是她操作时出了什么纰漏。
她仔细回忆了每一个步骤,反复检查了试剂的有效期和配制过程,
都没有发现明显问题。
时间一分一秒过去,每一分钟对抢救室外的患者来说都可能至关重要。
花瑶感到一丝焦虑,额头上渗出了细密的汗珠。
“不行,不能卡在这儿。”
她深吸一口气,决定求助。
在实验室,遇到技术难题向有经验的前辈请教,
是最快捷有效的解决方式,
也是科研和临床工作中必不可少的环节。
她起身走到正在隔壁工作台进行细胞培养的李教授身边。
李教授是微生物检测领域的权威,经验丰富。
“李教授,打扰您一下,我遇到个问题想请教您。”
花瑶的语气带着尊敬和一丝急切。
李教授抬起头,推了推眼镜,和蔼地问:
“哦,是瑶瑶啊,怎么了?遇到什么麻烦了?”
“是这样的,”
花瑶将李教授请到自己的工作台前,指着屏幕上的溶解曲线,
“我在给一个疑似感染的患者做几种病原体的PCR检测,
但是这个溶解曲线总是不理想,杂峰很多,
我排查了试剂和操作步骤,
没发现明显问题,
您能帮我看看吗?”
李教授凑近屏幕,
仔细观察了一会儿,
又询问了花瑶使用的引物序列、退火温度以及样本处理方法。
“嗯,引物序列是标准的,退火温度也没问题。”
李教授沉吟道,
“你用的是哪种DNA提取试剂盒?患者样本的性状如何?”
“用的是QIAap的,样本有点浑浊,
特别是脑脊液,压力不高,但颜色稍微有点发黄。”
花瑶回答。
“哦?”
李教授点点头,
“如果样本中含有较多的蛋白或其他抑制物,也会影响PCR反应的特异性。
山区来的患者,会不会有一些特殊的代谢产物或者共生微生物干扰?
这样,你试试用稀释后的模板再做一次,或者换一种高保真、抗抑制能力强的聚合酶看看。
另外,脑脊液样本离心后取上清再提取,或许能减少一些杂质。”
“稀释模板?换聚合酶?”
花瑶茅塞顿开,
“对啊,我怎么没想到这个!可能是样本基质太复杂了。
谢谢您李教授!”
“没事,”
李教授拍了拍花瑶的肩膀,
“遇到问题多思考,多请教,不丢人。
临床样本千变万化,经验都是一点点积累起来的。
快去试试吧,有结果了告诉我一声。”
“好的,太感谢您了李教授!”
花瑶感激地说,重新回到自己的岗位上,
按照李教授的建议,
有条不紊地开始准备新一轮的实验。
有了前辈的指点,她心中的焦虑消散不少,
重新充满了信心。
她知道,
每一个检测结果,
都可能是解开患者病因谜团的关键一环,容不得半点马虎。